所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种利用核酸适配体和磁性材料检测凝血酶（thrombin）的荧光检测方法，提供了一种基于核酸适配体和PEI‑Fe3O4检测凝血酶浓度的新型生物传感器，其中寡核苷酸带负电荷，PEI‑Fe3O4富含氨基而带正电，在缓冲液中，荧光标记的核酸适配体与PEI‑Fe3O4因静电引力而吸附到Fe3O4的表面而使荧光猝灭。在核酸适配体/PEI‑Fe3O4复合物体系中加入凝血酶，凝血酶与适配体结合从而使其远离PEI‑Fe3O4的表面，荧光得以恢复。所以，通过荧光值的变化，可以检测出凝血酶的浓度，本发现只需要改变核酸适配体的序列，就可以实现对其他底物分子的检测，在凝血酶检测领域具有重大的研究和应用意义。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供一株高效稳定生产L‑瓜氨酸的基因工程菌株CIT4，该菌株是以大肠杆菌为宿主，首先使宿主缺失精氨基琥珀酸合酶活性，以阻断L‑瓜氨酸降解为精氨酸琥珀酸；还在宿主基因组上整合了编码大肠杆菌精氨基琥珀酸合酶的基因argG，并由色氨酸启动子Ptrp进行表达调控；还使宿主缺失乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶活性；还在宿主基因组上整合了谷氨酸棒杆菌编码谷氨酸乙酰基转移酶的基因argJ，以此加强由谷氨酸合成乙酰谷氨酸过程中的代谢流量；还在宿主基因组上整合了枯草芽孢杆菌突变株A260编码氨甲酰磷酸合成酶两个亚基的基因pyrAA、pyrAB，以解除精氨酸对氨甲酰磷酸合成酶的反馈抑制，提高前体物质氨甲酰磷酸的供应。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种制备尿苷酸用酶制剂以及酶催化制备尿苷酸的方法，该制备方法采用含尿苷的料液为底物，加入具有尿苷激酶和聚磷酸激酶活性的大肠杆菌细胞破碎液、六偏磷酸钠、硫酸镁和少量ATP，在pH8.0，温度30℃的反应条件下进行酶促反应合成尿苷酸。在上述偶联催化反应体系中，尿苷激酶负责催化尿苷和ATP生成尿苷酸，同时伴随着ATP去磷酸化形成ADP。聚磷酸激酶负责催化六偏磷酸钠和ADP形成ATP，从而实现反应中ATP的再生。本发明提供的尿苷酸生产方法具有原料价格低廉，周期短，操作简便，绿色环保，产率高的优点，具有良好的工业应用价值。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及基因工程技术领域，尤其是一种基于复合碳源代谢分工产N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用。通过构建强化N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径，并敲除6‑磷酸果糖激酶基因，定向点突变甘油激酶表达基因，对甘油葡萄糖复合碳源的利用进行了代谢分工，使葡萄糖主要用于目标产物N‑乙酰氨基葡萄糖的生产，甘油主要用于细胞生长，以提高N‑乙酰氨基葡萄糖的合成效率。混合碳源培养基摇瓶发酵48h后N‑乙酰氨基葡萄糖的产量最高达到107.8g/L，复合碳源转化率最高达到49％，相比于葡萄糖利用菌株，产量提升了151.7％，转化率提升了60.2％，具有较强的工业化生产潜力。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种铜绿假单胞菌噬菌体K8假定蛋白GP075，其核苷酸序列为SEQNo.1，其氨基酸序列为SEQNo.10。本假定蛋白GP075发生突变，突变后的蛋白具有结构蛋白的功能，该类噬菌体突变株在原识别脂多糖的基础上，增加了额外的受体识别蛋白，可识别脂多糖O‑抗原缺陷型宿主细胞或者只含有核心寡糖结构（coreoligosaccharides）的宿主细胞，同时具有更宽的宿主范围、更强的裂解及吸附宿主细胞的能力，有望应用于噬菌体制剂，防治铜绿假单胞菌引起的各种感染。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种应用于筛选生物被膜抑制剂的新型报告基因系统，本申请证明bsrA基因能够抑制铜绿假单胞菌生物被膜的形成，其编码基因在细菌中过表达，能够显著抑制生物被膜的产量。因此，以该基因为标记，构建一种新型报告基因系统，筛选能够激活标记基因表达的小分子化合物，后者能够从基因水平对生物被膜的合成进行抑制，有助于解决由生物被膜引起的持续性感染、抗生素耐药性，同时通过研究该基因抑制生物被膜形成的机制能过更好的解决食品加工行业中微生物生物膜形成机制以及生物被膜的抑制和去除问题。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供一种5α‑还原酶突变体，通过定点突变改造的5α‑还原酶获得5α‑还原酶突变体，构建其基因工程菌并应用在高效催化5α‑AD生产中的应用，定点突变改造的5α‑还原酶是将第187位酪氨酸突变为苯丙氨酸，将5α‑还原酶突变体重组质粒电转至分枝杆菌中进行异源表达，再对其酶活性和生产效率进行测定，发现5α‑还原酶突变体的分枝杆菌基因工程菌酶活力提高了2.3倍，其催化效率提高了22.8％，对5α‑AD的生产由原来的1.45g/L提高到了1.78g/L；将5α‑还原酶突变体作为重要甾体药物中间体生产的关键酶，可以明显提高生物转化的效率和产品的得率。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于甾醇生物转化技术领域，具体涉及一种混菌发酵生物转化植物甾醇制备甾体药物中间体11α‑羟基‑雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮的方法。本发明将分枝杆菌TCCC11028M3接入含有植物甾醇和转化介质环糊精的发酵培养基中，培养24h后接种赭曲霉CICC41473孢子液继续进行转化。本发明利用混菌发酵实现了由植物甾醇到11α‑羟基‑雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮的一步转化。此方法提高了产物的生成率，缩短了转化周期，简化操作，节约成本，适用于甾体化合物生物转化的生产。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉（Aspergillusniger）基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3‑磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉（Aspergillusniger）基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物发酵技术领域，具体涉及一种高产聚苹果酸的菌株及提高聚苹果酸产量的方法，具体为产黑色素短梗霉（Aureobasidiummelanogenum）BCSW‑001，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2019年11月22日，保藏编号为：CGMCCNO.18996；将产黑色素短梗霉活化后在含玉米浆的条件下发酵大幅度提高聚苹果酸产量，其方法简单，直接在发酵培养基中加入玉米浆，具有发酵成本低、产量高、技术经济性强等优点，可应用于聚苹果酸工业生产。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供一种石莼多糖裂解酶突变体及其应用，属于基因工程领域。所述酶的活性在石莼多糖中提供降解功能。本发明所述石莼多糖裂解酶突变体，是由野生型石莼多糖裂解酶氨基酸序列基础上，发生第35位由Asn突变为Pro，该突变体和野生酶的最适温度和最适pH都为40℃和9.0，突变体的比活力是野生酶的1.35倍左右。在最适反应条件下，突变体的催化效率相比野生型提高了2倍左右。以石莼粉为底物时，突变酶的催化反应所产还原糖含量是野生型降解底物的1.27倍，可以看出突变酶显著提高了酶活力，可以降低工业应用的经济成本。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种恩拉霉素高产菌株及其构建方法。本发明将传统高产菌的选育与转录组测序技术相结合，通过对比已知的两株抗性存在显著差异的菌株的基因组序列，进而找到两株菌的基因组序列之间的不同碱基并确定其所在基因组序列中的位置和它所决定的基因名称及作用，针对该基因对抗生素生产菌株进行遗传操作，从而筛选出高抗性工程菌株。获得的基因工程菌较原始菌株的恩拉霉素产量分别提高了5％，18.3％和19.5％，本发明为恩拉霉素高产菌株的选育提供了一种新思路。