所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及基因工程技术领域，尤其是一种基于复合碳源代谢分工产N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用。通过构建强化N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径，并敲除6‑磷酸果糖激酶基因，定向点突变甘油激酶表达基因，对甘油葡萄糖复合碳源的利用进行了代谢分工，使葡萄糖主要用于目标产物N‑乙酰氨基葡萄糖的生产，甘油主要用于细胞生长，以提高N‑乙酰氨基葡萄糖的合成效率。混合碳源培养基摇瓶发酵48h后N‑乙酰氨基葡萄糖的产量最高达到107.8g/L，复合碳源转化率最高达到49％，相比于葡萄糖利用菌株，产量提升了151.7％，转化率提升了60.2％，具有较强的工业化生产潜力。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种铜绿假单胞菌噬菌体K8假定蛋白GP075，其核苷酸序列为SEQNo.1，其氨基酸序列为SEQNo.10。本假定蛋白GP075发生突变，突变后的蛋白具有结构蛋白的功能，该类噬菌体突变株在原识别脂多糖的基础上，增加了额外的受体识别蛋白，可识别脂多糖O‑抗原缺陷型宿主细胞或者只含有核心寡糖结构（coreoligosaccharides）的宿主细胞，同时具有更宽的宿主范围、更强的裂解及吸附宿主细胞的能力，有望应用于噬菌体制剂，防治铜绿假单胞菌引起的各种感染。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种应用于筛选生物被膜抑制剂的新型报告基因系统，本申请证明bsrA基因能够抑制铜绿假单胞菌生物被膜的形成，其编码基因在细菌中过表达，能够显著抑制生物被膜的产量。因此，以该基因为标记，构建一种新型报告基因系统，筛选能够激活标记基因表达的小分子化合物，后者能够从基因水平对生物被膜的合成进行抑制，有助于解决由生物被膜引起的持续性感染、抗生素耐药性，同时通过研究该基因抑制生物被膜形成的机制能过更好的解决食品加工行业中微生物生物膜形成机制以及生物被膜的抑制和去除问题。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供一种5α‑还原酶突变体，通过定点突变改造的5α‑还原酶获得5α‑还原酶突变体，构建其基因工程菌并应用在高效催化5α‑AD生产中的应用，定点突变改造的5α‑还原酶是将第187位酪氨酸突变为苯丙氨酸，将5α‑还原酶突变体重组质粒电转至分枝杆菌中进行异源表达，再对其酶活性和生产效率进行测定，发现5α‑还原酶突变体的分枝杆菌基因工程菌酶活力提高了2.3倍，其催化效率提高了22.8％，对5α‑AD的生产由原来的1.45g/L提高到了1.78g/L；将5α‑还原酶突变体作为重要甾体药物中间体生产的关键酶，可以明显提高生物转化的效率和产品的得率。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于甾醇生物转化技术领域，具体涉及一种混菌发酵生物转化植物甾醇制备甾体药物中间体11α‑羟基‑雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮的方法。本发明将分枝杆菌TCCC11028M3接入含有植物甾醇和转化介质环糊精的发酵培养基中，培养24h后接种赭曲霉CICC41473孢子液继续进行转化。本发明利用混菌发酵实现了由植物甾醇到11α‑羟基‑雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮的一步转化。此方法提高了产物的生成率，缩短了转化周期，简化操作，节约成本，适用于甾体化合物生物转化的生产。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉（Aspergillusniger）基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3‑磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉（Aspergillusniger）基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物发酵技术领域，具体涉及一种高产聚苹果酸的菌株及提高聚苹果酸产量的方法，具体为产黑色素短梗霉（Aureobasidiummelanogenum）BCSW‑001，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2019年11月22日，保藏编号为：CGMCCNO.18996；将产黑色素短梗霉活化后在含玉米浆的条件下发酵大幅度提高聚苹果酸产量，其方法简单，直接在发酵培养基中加入玉米浆，具有发酵成本低、产量高、技术经济性强等优点，可应用于聚苹果酸工业生产。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供一种石莼多糖裂解酶突变体及其应用，属于基因工程领域。所述酶的活性在石莼多糖中提供降解功能。本发明所述石莼多糖裂解酶突变体，是由野生型石莼多糖裂解酶氨基酸序列基础上，发生第35位由Asn突变为Pro，该突变体和野生酶的最适温度和最适pH都为40℃和9.0，突变体的比活力是野生酶的1.35倍左右。在最适反应条件下，突变体的催化效率相比野生型提高了2倍左右。以石莼粉为底物时，突变酶的催化反应所产还原糖含量是野生型降解底物的1.27倍，可以看出突变酶显著提高了酶活力，可以降低工业应用的经济成本。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种恩拉霉素高产菌株及其构建方法。本发明将传统高产菌的选育与转录组测序技术相结合，通过对比已知的两株抗性存在显著差异的菌株的基因组序列，进而找到两株菌的基因组序列之间的不同碱基并确定其所在基因组序列中的位置和它所决定的基因名称及作用，针对该基因对抗生素生产菌株进行遗传操作，从而筛选出高抗性工程菌株。获得的基因工程菌较原始菌株的恩拉霉素产量分别提高了5％，18.3％和19.5％，本发明为恩拉霉素高产菌株的选育提供了一种新思路。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属生物技术领域，主要涉及一株具有抑藻活性的枯草芽孢杆菌斯氏亚种菌株及其在抑制和预防虾蟹养殖塘蓝藻水华方面的应用。所述菌株具体为枯草芽孢杆菌斯氏亚种（Bacillussubtilissubsp.spizizenii）TK812，该菌株于2020年11月3日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNO.20996。本发明中首次采用枯草芽孢杆菌斯氏亚种来防治蓝藻水华，所用枯草芽孢杆菌斯氏亚种分离自自然界，无基因修饰，无二次污染威胁；且本发明提供的菌剂中不含防腐剂，化学添加剂，无化学污染威胁，成本低廉，应用前景广阔。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供了一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacterglobiformis）的D‑阿洛酮糖‑3差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D‑果糖异构化为D‑阿洛酮糖，为工业化生产D‑阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。