所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种生产2’‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其应用，属于微生物代谢工程领域。本发明提供的2’‑岩藻糖基乳糖从头合成途径关键酶表达水平的调控策略，通过将不同的酶分别进行基因组过表达或者质粒过表达的调控，能够大幅提高代谢通路的效率，利用相关策略构建的基因工程菌株，与现有技术相比提高13倍以上，为2’‑岩藻糖基乳糖的工业生产奠定了基础。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种耐碱性能提升的脂肪酶突变体及其制备与应用。通过分子生物学技术手段获得野生型的脂肪酶基因，利用易错PCR技术对大肠杆菌密码子优化后的野生型脂肪酶基因进行随机突变，得到脂肪酶突变体N157F，及其编码基因mpcl，重新构建重组载体，并实现了其在枯草芽孢杆菌WB600和毕赤酵母GS115中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得碱耐受性进一步提高的脂肪酶。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物技术领域，具体涉及一株产甲壳素脱乙酰基酶的马红球菌诱变菌株F6‑C7及其应用。所述甲壳素脱乙酰基酶高产菌株具体为马红球菌(Rhodococcusequi)F6‑C7，保藏编号为CGMCCNo.15723。该菌株是在原始菌株马红球菌F6的基础上，通过ARTP和紫外复合诱变获得，发酵18‑24h后，发酵液中的甲壳素脱乙酰基酶含量达到3400‑3850U/mL，该菌株产甲壳素脱乙酰基酶的速度极快，是目前报道可生产甲壳素脱乙酰基单位酶活力最高的菌株，易于大规模培养。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明公开了一种用于L‑肌氨酸生产的基因工程菌及构建方法与应用，基因工程菌是以大肠杆菌为宿主，通过在其基因组上整合单拷贝亚胺还原酶基因dpkA；单拷贝柠檬酸合酶基因gltA；敲除乙醛酸循环抑制基因iclR；敲除苹果酸合酶基因aceB；单拷贝异柠檬酸裂解酶基因aceA；单拷贝膜结合转氢酶基因pntAB；敲除2‑酮酸还原酶基因ycdW；单拷贝磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因ppc；敲除丙酮酸激酶基因pykF获得。通过系统代谢改造后，工程菌能够以葡萄糖和甲胺为主要原料合成L‑肌氨酸。在5L发酵罐发酵30h后L‑肌氨酸的产量可达10g/L。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种高产L‑亮氨酸的相关基因及工程菌构建方法与应用，⑴将leuA突变基因整合至cgl1135假基因位点，leuA突变基因见序列1；⑵将ilvBN突变基因整合至cgl1890假基因位点，ilvBN突变基因件序列2；⑶PCP_2928特异性启动子替换柠檬酸合酶原始启动子，PCP_2928特异性启动子序列见序列3。采用本发明所提供的技术方案在摇瓶发酵30h可生产L‑亮氨酸32g/L，在5L发酵罐发酵50h左右可生产亮氨酸60g/L，最大生产强度可达1.5g/(L×h)，糖酸转化率为30％，是目前报道的发酵法生产L‑亮氨酸的最高水平。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物技术领域，具体涉及甲壳素脱乙酰基酶高产菌株及其应用。所述甲壳素脱乙酰基酶高产菌株具体为马红球菌(Rhodococcusequi)F6，保藏编号为CGMCCNo.14861。该菌株产甲壳素脱乙酰基酶的速度极快，是目前首次报道可生产甲壳素脱乙酰基的马红球菌，也是现有技术中所有发酵产甲壳素脱乙酰基酶最快的菌株，易于大规模培养。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种稳定表达抗TNF‑α单克隆抗体的细胞表达体系及构建方法和应用，依照细胞密码子偏爱性将抗TNF‑α单克隆抗体的轻、重链编码基因进行优化，构建了以Bak1基因等做为靶标的抗TNFα人鼠嵌合单克隆抗体同源重组载体，同时针对Bak1等靶标基因外显子区域构建具有特异性切割作用的CRISPR/Case9载体，釆用脂质体转染的方式将两种载体共同导入中华仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞，筛选获得稳定表达抗TNF‑α单克隆抗体的阳性细胞株。本发明可用于抗TNF‑α单克隆抗体的高效生产，该抗体可用于类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等疾病的治疗。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物催化技术领域，具体涉及一种通过强化甾药生产菌株胞内NADH脱氢实现增强甾药前体生产的方法。本发明引入在甾药生产菌株属微生物体内存在的不具有质子泵功能的NADH脱氢酶‑NDH2，构建NDH2加强的甾药前体生产菌株，以加强甾药前体生产菌株内NADH的脱氢，解决甾药前体微生物转化生产过程中NADH过量积累而导致的发酵周期长、生产效率低的问题，有助于降低甾药前体生产过程中的能耗以节约生产成本。该方法可有效用于其他工业生产菌株胞内NADH脱氢的加强，具有广泛的应用价值，为甾药前体生产成本的降低提供了新方法。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物催化技术领域，具体涉及一种提高甾药生产菌株活力高效发酵生产甾药前体的方法。本发明将通过过表达Ⅱ型NADH脱氢酶基因提高甾药生产菌株活力高效发酵生产甾药前体，以解决微生物法甾药前体生产时存在的发酵周期长、生产效率低的问题，为甾药前体生产成本的降低提供新方法。

所属分类：医疗健康

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成果简介：本发明涉及一种棒状杆菌诱导型启动子及含有该启动子的表达载体与应用，所述表达载体转化至谷氨酸棒状杆菌获得的5‑氨基乙酰丙酸生产菌株并利用该菌株发酵法生产5‑氨基乙酰丙酸。用本发明获得的启动子构建的表达载体，通过肌醇诱导实现基因的可控表达，克服了现用诱导剂异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷(Isopropylβ‑D‑Thiogalactoside，IPTG)对菌体细胞生长的抑制作用以及因其价格高昂造成的生产成本高等不足，同时具有稳定性等特性。利用该启动子整合于宿主基因组或将表达载体转化至宿主谷氨酸棒状杆菌构建获得5‑氨基乙酰丙酸生产菌株，其5‑氨基乙酰丙酸产量达到24.2g/L。

所属分类：医疗健康

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成果简介：本发明属于甾体生物转化技术领域，具体涉及一株能有效降解植物甾醇侧链高产9α‑OH‑AD的偶发分枝杆菌及其应用。所述偶发分枝杆菌是一株经物理化学复合诱变获得的诱变菌株，其9α‑OH‑AD生成率最高可达97％；10g/L植物甾醇底物浓度下，9α‑OH‑AD生成率最为95.7％，是出发菌株的1.21倍，生物转化时间为72h，较出发菌株缩短24h，是目前现有技术中，以植物甾醇为底物生产9α‑OH‑AD转化率最高，转化时间最短的分枝杆菌，具有良好的工业化应用前景。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明提供了一种L‑谷氨酸生产菌株及其构建方法与应用，所述L‑谷氨酸生产菌株通过基因敲除实现细胞壁和细胞膜的双转型控制，获得具有缺陷的谷氨酸棒杆菌，进而解决生物素亚适量菌株在发酵后期出现的菌体活力下降等问题，采用“双开关”发酵生产L‑谷氨酸，通过交替控制D‑谷氨酸和生物素两个转型“开关”，达到菌体快速转型和提高菌体发酵后期菌体活力的效果。