047的基因工程操作平台，针对外源DNA难以进入面包乳杆菌MN047细胞内的问题，本研究采取电转化的方法进行了尝试，通过逐步优化电转化中涉及的每一个参数，最终获得了高效率的转化方法。构建了面包乳杆菌MN047的基因编辑平台。利用此系统对10个细菌素编码基因，两个转录因子，以及乙醇脱氢酶基因的敲除效率明显提高，对一些基因的敲除效率高达100%。为了方便后续研究基因调控的关键位点，以及更方便地构建突变菌株，还开发了单碱基突变系统。该系统在双质粒基因敲除系统的基础上，引入了胞苷酸脱氨基酶，可以将胞嘧啶转化为胸腺嘧啶。此系统可以将任意基因中的CAG、CGA、CGG位置方便地突变为终止密码子，由此使得基因失活。此外，还可以对任意编码蛋白质基因的某些氨基酸进行突变，研究蛋白质的关键活性位点。该系统对编辑位点的选择性分析发现，对位于gRNA中4-7个碱基出的编辑效率最高，效率在50%-100%之间。对此区域之外的位点的编辑效率则显著降低。基于此系统，课题组对potA，prpC，lexA，lutP等富含C的基因进行了突变，获得了一批突变菌株，为后续试验积累了实验材料。 上述结果累计发表SCI论文4篇。