[00336494]乳病消片含药学清诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用及机制研究

①课题来源与背景 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈现逐年上升的趋势。世界卫生组织调查统计资料表明全球每年约有130万人诊断为乳腺癌,且有50万人死于乳腺癌。而在我国,乳腺癌在城市中发病率的排名为女性恶性肿瘤的第二位,一些大城市中已经上升至首位,乳腺癌已经成为妇女健康的最大威胁。因此乳腺癌的预防与治疗已经成为刻不容缓的任务。传统的手术及放、化疗过程会引起各种并发症和后遗症,使患者的生存质量及行为状态均较差,具有诸多的局限性。目前,随着中医药在乳腺癌治疗中所起的作用越来越受到重视,复方中药己经成为乳腺癌综合治疗中的一个重要组成部分。 中药血清药理学是指将中药或中药复方经口给动物灌服一定时间后采集动物血液、分离血清,用此含有药物成分的血清进行体外实验的一种实验技术。该方法不但能反映中药及其代谢产物的药理作用,而且能反映可能由药物诱导机体内源性成分所产生的作用,更接近药物在体内环境产生的真实过程,尤其适合于化学成分复杂的中药及其复方的药理学研究。目前,血清药理学方法已成为研究中药复方药理学最有效的方法,同时也为细胞分子水平研究中药复方药理学作用提供了新的手段。 乳病消片是兰大二院自制中药复方制剂,由柴胡,红花,丹参,元胡,当归,淫羊藿等十五味中药组成,具有疏肝解郁,软坚散结,活血化瘀,消肿止痛之功效,目前临床主要用于治疗乳腺炎和乳腺增生。该制剂临床应用数十年,疗效肯定,但一直以来缺乏现代药理学研究,其对人乳腺癌MCF-7细胞的作用更是上未见任何报道。 ②研究目的与意义 本研究拟通过血清药理学方法研究乳病消片含药血清对对 MCF-7 细胞增殖和凋亡的影响,并采用分子生物学手段初步探讨其机制,这将为为乳病消片的临床应用提供重要现代药理学理论支持,也为乳病消片用于乳腺癌的治疗提供重要的实验依据。 ③主要论点与论据 与对照组相比较,乳病消片含药血清（25%、50%和100%）作用24 h、48 h、72h后均能明显抑制MCF-7细胞增殖（P﹤0.01;P﹤0.001;P﹤0.001）。乳病消片含药血清作用 48 h后,G0 /G1 期细胞比例显著增加（P﹤0.05）,S期细胞比例显著减小（P﹤0.05）,凋亡率显著升高（P﹤0.01）随着乳病消片含药血清作用浓度增加,MCF-7细胞核碎裂、浓缩程度和蓝色荧光强度呈剂量依赖地增加,中剂量和大剂量组出现凋亡小体。Cyt-C,Caspase-3及Caspase-9表达均显著增加（P﹤0.05,P﹤0.05,P﹤0.05）。 可见,乳病消片含药血清对乳腺癌MCF-7细胞增殖具有显著的抑制作用,能够引起细胞周期G0 /G1阻滞,诱导细胞凋亡,其机制可能与启动线粒体凋亡途径有关。 ④创见与创新 本项目将首次通过血清药理学研究方法完成对我院中药复方制剂乳病消片抗人乳腺癌 MCF-7 细胞增殖作用的药效学评价,并初步阐明其作用机制,为乳病消片的临床应用提供重要现代药理学理论支持,也为乳病消片用于乳腺癌的治疗提供室实验依据。 ⑤社会经济效益,存在的问题 本项目研究成果为乳病消片辅助治疗乳腺癌提供了理论依据,对其临床应用具有一定的促进作用。 存在的问题有：乳病消片作用的物质基础尚不明确,还需进一步深入研究。 ⑥历年获奖情况。 无