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类型： 非专利
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课题来源与背景： ①本课题来源于国家质检总局科技计划项目（SNQTS2010QK269）,由陕西省质量技术监督局部分配套经费支持,陕西省产品质量监督检验所主持完成。 食品安全问题一直是人们关注的焦点。阪崎肠杆菌（Enterobacter Sakazakii）是近年来受到广泛关注的食源性病原菌,是食品安全与质量检测的一项重要指标。国家食源性疾病监测网2008年工作报告婴儿配方奶粉和婴儿谷物配方粉中阪崎肠杆菌检出率分别为2.03%和7.39%,显示国产婴幼儿配方食品中阪崎肠杆菌污染存在潜在食用安全风险。鉴于阪崎肠杆菌是一种重要的食源性病原菌,应加强对婴幼儿配方食品中阪崎肠杆菌的检测。 ②技术原理及性能指标 分子信标的基本原理：自由状态时,分子信标发卡结构的两个末端靠近,使荧光分子与淬灭分子靠近,此时发生荧光共振能量转移（FRET）,使荧光分子发出的荧光被淬灭分子吸收并以热的形式散发,荧光几乎完全被淬灭,荧光度极低,当分子信标与靶分子结合时,荧光基团和淬灭基团之间的距离加大,从而,分子信标的荧光几乎100%恢复。 以此为理论基础,建立婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分子信标—荧光定量PCR方法,检测该方法的特异性、灵敏度及该方法与传统的分离培养方法的一致性。 ③本项目的特色和创新之处 本研究率先在国内将分子信标技术用于婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌的检测;利用内标质粒有效排除假阴性,提高检测效率。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性 本课题通过分子信标荧光定量PCR法建立检测婴儿奶粉中阪崎肠杆菌的检测方法,为更准确的进行阪崎肠杆菌的鉴定工作奠定基础。其研究成果可以广泛的应用于婴儿配方奶粉及其他食品的微生物鉴定等领域。 ⑤应用情况及存在的问题 本研究方法特异性强,但缩短检测时间、提高灵敏度应是下一步的研究重点。在实际检测过程中还应该注意：质粒作为标准品容易形成污染,所以对于标准品的操作一定要与样品分区,并使用专用的移液器。
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