[00336061]吡格列酮对心血管保护作用及其机制研究

冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary atherosclerotic heart disease,CHD）常常称为冠心病,是一种严重的缺血性心肌病,指冠状动脉粥样硬化性病变,导致管腔狭窄、阻塞或痉挛性改变,导致心肌细胞缺血、坏死而引起的心脏疾病。近年来,临床上对于急性冠脉综合症的药物溶栓、PTCA及冠状搭桥术等治疗,使冠心病的治疗进入再灌注时期,但是冠状动脉血流再通后将直接面临心肌缺血再灌注损伤（Myocardial ischemia-re perfusion injury,MIRI）等重大的临床问题。再灌注损伤最常在灌注的前数分钟内发生,导致细胞内皮功能障碍、心肌细胞缺血坏死、凋亡,其损伤程度较缺血期更为严重,常常出现致死性再灌注损伤、心肌顿抑、再灌注心律失常以及血管损伤等。大量研究报道,心肌缺血再灌注损伤的机制十分复杂,目前主要包括氧自由基堆积、钙超载、能量代谢障碍、血管内皮细胞、细胞凋亡、血管紧张素增加等。细胞凋亡在心肌梗死过程中发挥重要的作用,是心肌局部组织缺血再灌注损伤后细胞死亡的主要方式,因此目前抗细胞凋亡机制已经成为心肌细胞再灌注损伤的重要途径。 本研究采用临床观察与基础研究,从整体与分子水平进行研究：盐酸吡咯列酮作为糖尿病的常规用药在控制血糖之外还可以通过减低血管的炎症反应,抗动脉硬化,抗凋亡等机制而对合并糖尿病的冠心病患者起到心肌保护作用。 本课题通过观察健康雄性Wistar大鼠在盐酸吡格列酮干预后对其胸主动脉内膜及肌层厚度的变化以及免疫组化分析各组间动脉壁核因子κBp65（NF-κBp65）含量的变化,进而探讨是否可以通过抑制炎症基因NF-κBp65的表达而抑制动脉粥样硬化。心脏缺血30分钟后心肌的葡萄糖调节蛋白-78（GRP78）,caspase-12蛋白以及心肌细胞p-JNK、c-Jun氨基末端激酶（JNK）表达的影响,进而探讨是否可以通过抑制这些表达减轻内质网凋亡,从而保护心机功能。吡格列酮及与阿托伐他汀联用预处理大鼠后其心脏缺血30分钟,再灌注1小时后血清心肌酶（CK-MB、LDH） 及一氧化氮（NO）含量的测定及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）,并计算心肌梗死面积,观察吡格列酮对再灌注心肌的保护作用,并与阿托伐他汀的协同作用,并对其机制进行研究。暴露心脏后结扎冠脉左前降支的方法进行缺血再灌注。摘取心脏后测定心肌梗死面积。Western-blot法测定各组心肌组织p-CREB蛋白的表达。进而探讨p-CREB蛋白在吡格列酮预处理心肌缺血再灌注损伤中（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）的保护作用。 根据以上基础研究观察大鼠在盐酸吡格列酮干预后对其胸主动脉内膜及肌层厚度以及动脉壁核因子κBp65（NF-κBp65）含量的影响,发现盐酸吡格列酮具有抗动脉粥样硬化作用;通过建立心肌的缺血再灌注模型观察吡格列酮预处理对大鼠的心肌葡萄糖调节蛋白-78（GRP78）,caspase-12,JNK、p-JNK、p-CREB、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）,对一氧化氮（NO）及内皮素（ET）表达的影响证实该药物可以通过抑制凋亡、抗炎而对减少缺血再灌注损伤等方面有明显的作用; JNK等通路介导的内质网应急凋亡途径可能是吡格列酮对心肌再灌注损伤的保护新机制之一;同时还探讨了盐酸吡格列酮与阿托伐他汀联用时对心肌保护的协同作用。 该项目临床研究部分显示2型糖尿病合并急性冠脉综合征患者在行冠脉内支架植入术（PCI）后加用盐酸吡格列酮减少了该类患者的近期心血管事件。