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[00336051]RNA干扰抑制Livin基因表达诱导肺腺癌SPC-A1细胞凋亡的实验研究

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技术详细介绍

肺腺癌肿瘤组织存在livin基因表达增高,检测livin有助于肺癌的诊断和组织分型。将重组的质粒转染肺腺癌SPC-A1细胞,在mRNA及蛋白水平特异沉默livin表达下调,诱导凋亡,抑制细胞增殖。本项目通过免疫组化法检测Livin在肺癌组织和正常肺组织中的表达,发现Livin 在NSCLC 组织中特异性地高表达,可能成为NSCLC 诊断上新的标记物和治疗上新的靶点和治疗的重要依据。将siRNA-Livin转染SPC-A1,Real-Time PCR检测Livin基因的表达水平,MTT检测干扰组和干扰加药组肿瘤细胞的增殖及活性;TRAIL、Flavopiridol单独及联合作用诱导细胞凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡抑制蛋白Livin的表达水平,MTT检测各处理组细胞的增殖及活性,结果发现RNA干扰和F+T联合用药都能显著降低凋亡抑制蛋白Livin的表达,有效抑制肿瘤细胞的增殖生长,并增强肿瘤细胞对化疗药物顺铂的敏感性,为肺腺癌的靶向治疗提供新的理论依据。目前对于Livin的各项研究还处于试验阶段,本项目研究内容切实可行,对临床有一定指导意义;实验方法有一定新颖性,为进一步研究Livin作为肺腺癌诱导凋亡治疗分子靶点的可能性以及靶向诱导肺腺癌细胞凋亡治疗奠定了理论和实验基础。指导研究生4名;为肺腺癌的诊断和治疗探寻到经济有效安全可靠的新途径。

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