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[00335747]模拟体内胎盘屏障的新型细胞模型构建及HCMV宫内感染机制初探

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类型: 非专利

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技术详细介绍

人巨细胞病毒(HCMV)是宫内感染中最常见的病原体之一,可导致0.2~2.5%新生儿发生先天性HCMV感染并引起神经系统异常后遗症,但其感染机制尚未完全阐明。本项目通过原代人滋养层细胞/原代人脐静脉内皮细胞和人滋养层细胞株HTR8/人脐静脉内皮细胞株HUVEC微滤器分层接种的方法成功构建了模拟胎盘屏障的细胞模型,HCMV体外感染实验结果表明四种细胞均对HCMV易感,从而提示HCMV可能通过血液和滋养层细胞两种途径跨越胎盘屏障;通过多种抗体阻断和免疫共沉淀实验发现四种细胞的HCMV受体分别是EGFR/αVβ3、αVβ3/α5、EGFR/α5、EGFR,这些受体分别与HCMV包膜糖蛋白gB、gH结合参与了HCMV对宿主细胞的感染;进一步用PHD7噬菌体随机肽库和生物信息学方法筛选出三个可能参与HCMV识别宿主细胞并进行膜融合的功能域,根据所获得的多肽顺序,人工合成三个多肽,其中两个小分子多肽可以有效阻断HCMV对滋养层细胞株HTR8和脐静脉内皮细胞株HUVEC的感染。以上结果为阐明HCMV宫内感染机制提供了新思路,并为抗HCMV感染提供新的策略。

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