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[00335204]血清淀粉样蛋白A作为胃癌早期诊断预警标志物的筛选与鉴定

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技术详细介绍

胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,世界上胃癌的年发病率占各部位恶性肿瘤的第4-5位。2002年全球新发、死亡的癌症病例中,胃癌高居癌症死亡原因的第2位,约70万。而我国又是胃癌高发国之一,其发病率和死亡率均占各种恶性肿瘤之首。目前,已发现可用于胃癌诊断的血清标志物有CEA、CA724、CA50、SIMA、端粒酶等,可用免疫学方法检测。这些标记物对于胃癌的诊断和判断术后有无转移复发有一定的临床意义,但单项指标的检测灵敏度仅为18-40%,联合应用的结果虽然可达60-80%,但假阳性率较高,难以用于早期诊断。 近年来,随着蛋白质组学的发展,筛选和鉴定潜在的、更具诊断价值的肿瘤标记物,并探讨这些标记物在临床诊断、疗效观察及癌症复发中的应用价值已成为研究的热点。本研究在前期工作-应用激光解析电离飞行时间质谱结合蛋白质芯片技术,对不同分期胃癌病例组(按UICC分期:Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级)、胃良性对照组(胃炎、胃溃疡)和健康对照组进行蛋白指纹图谱分析,筛选出不同分期胃癌差异蛋白的基础上,应用高效液相色谱技术纯化差异蛋白并用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)初步鉴定胃癌差异蛋白,发现其中M/Z为11.1-11.9KD的一簇差异蛋白为血清淀粉样蛋白A,与胃癌密切相关。通过对该目标蛋白进行酶解并行LC-MS/MS分析,确定目标蛋白及目标蛋白的氨基酸序列。从而根据血清淀粉样蛋白A在胃癌蛋白指纹图谱中的表达,探讨了血清淀粉样蛋白A在胃癌不同分期,其与胃癌发生发展的关系以及作为早期胃癌潜在生物标志物的应用价值,为胃癌的防治提供新的手段和思路。

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