[00334649]新型氟化酶在PET（正电子发射断层扫描）标记中的应用

交易价格： 面议

类型： 非专利

技术成熟度： 通过小试

交易方式： 完全转让

联系人：天津科技大学

所在地：天津天津市

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技术详细介绍

氟化酶（FIA）是唯一可以将无机氟安装到有机分子中以形成碳氟键的酶。

FIA能够在温和条件下在水溶液中形成C-F键，因此，这种“绿色”反应对于PET（正电子发射断层扫描）放射性示踪剂的制备非常理想。

但是，总的来说，就生物转化能力而言，氟化酶是相对“慢的酶”。而且，作为催化剂的稳定性低。

因此，当前研究的目的是检查我们是否可以通过标记合适的SAP伙伴来增强荧光酶的酶活性，热稳定性和可重复使用性。

自组装短肽标签是具有亲水性残基和疏水性残基序列的一种双亲性短肽，在与目的蛋白结合后，能够促使目的蛋白自组装具有纳米尺寸的蛋白质聚集体。

由此出发我们制备三种SAP(self-assembling amphipathic peptides) 自组装双亲短肽融合氟酶，分别为18A，L6KD和ELK16。

技术突破为：

(1) 发现经过SAP融合的氟酶以包涵体形式存在，但仍保有催化活性。

(2) 在纯化上，SAP氟酶可以一步纯化，摆脱了传统的亲和层析色谱纯化浓缩的方式，缩短制备时间和成本。

(3) 发现可溶性氟酶的最适温度在40oC，ELK的最适温度同样为37oC；而L6KD的酶活最适温度在50oC，18A的酶活最适温度在60oC。并且18A的催化常数 (K ) 较可溶性氟酶提高一倍以上。

(4)SAPcat氟酶如FIA-L6KD在其最适温度的酶活半衰期t 为88.86分钟，远远高于可溶性1/2氟酶的在其最适温度的酶活半衰期t 52.12分钟。

(5)SAP氟酶能够循环利用，1/2经过 9 次重复利用后，FIA-ELK16、FIA-L6KD and FIA-18A 的活性分别保留了76.3%、63.8% 和46.4%。

在生物酶催化剂的自组装技术中的应用，将会大幅提高级联催化反应的催化效率，获得显著的经济效益；而且，该氟化酶成果亦可为正电子发射断层成像术的广泛应用提供新选择。

同时，对促进我国恶性肿瘤诊断检测行业的发展及增加经济效益具有十分重要的研究价值。

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