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“肾主骨”是中医重要的基本理论之一,骨髓在“肾主骨”过程中起着非常重要的作用,其中有许多对骨形成与骨吸收具有调节作用的蛋白质。本项目以此为切入点,以卵巢切除大鼠作为肾虚动物模型,用具有滋补肾阴作用的左归丸进行干预;在检测机体在肾虚状态以及补肾后,骨量以及骨形成与骨吸收变化情况的基础上,采用蛋白质双向凝胶电泳（2-DE）、质谱分析（MS）和蛋白质印迹（Western-blot）技术,从骨髓中探索出与“肾主骨”密切相关的标志蛋白质。 研究结果表明： 切除大鼠卵巢14周后,作为骨量主要标志的胫骨TBV%显著降低,而代表骨吸收参数的TRS%,以及代表骨形成参数的TFS%、MAR、OSW和mAR均显著增高,说明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症;而左归丸能在一定程度上使上述指标发生逆转,表明其对卵巢切除所致的大鼠骨质疏松症具有一定的预防作用。 应用蛋白组学方法从大鼠股骨骨髓中分析鉴定出11个差异蛋白质。其中,模型组骨髓中高表达而被左归丸下调至正常组水平的蛋白质有果糖醛缩酶A、抗氧化蛋白6、α烯醇化酶、烯醇化酶3、白蛋白、钙网蛋白、蛋白二硫化物异构酶A3;模型组骨髓中低表达而被左归丸上调至正常组水平的蛋白质有碳酸酐酶1.S100-A8蛋白。这些差异蛋白质主要涉及能量代谢、抗氧化、信号传导、细胞增殖、分化和凋亡等多方面的功能。说明在分子水平上,左归丸可通过调节骨髓内细胞增殖、分化、凋亡和能量代谢以及氧化反应等来实现对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的预防作用。同时基于中医理论对绝经后骨质疏松症的认识,这些差异蛋白质是与绝经后骨质疏松症发生密切相关的蛋白质,也是与“肾主骨”密切相关的蛋白质。这一研究不仅从分子水平部分揭示了“肾主骨”的机理,而且也为从现代医学角度阐明中医“肾”的本质提供了进一步的科学依据;因此,具有重要的理论意义。
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