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[00334015]猪流行性腹泻病毒新型检测方法的建立及应用

交易价格: 面议

类型: 非专利

交易方式: 资料待完善

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技术详细介绍

本项目属于农业生产中的畜牧兽医领域。首先通过对NCBI登陆的经典及变异猪流行性腹泻病毒毒株序列进行比对、分析,设计并筛选出了两对引物序列用于PCR扩增,并通过对PCR扩增条件的优化,成功的建立了套式PCR的检测方法。通过提取待检测样品中的RNA,经反转录后先使用引物F1和R1进行第一轮PCR,产物留一部分进行琼脂糖凝胶电泳,另一部分继续作为模板,以F2和R2为引物进行第二轮PCR,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后观察条带,如果第一轮PCR产物仅有一条458 bp的条带,第二轮没有,则表明待检样品中含有经典PEDV;如果第一轮PCR产物仅有一条467bp的条带,第二轮仅有一条201bp的条带,则表明待检样品中含有变异的PEDV;如果两轮PCR产物均没有条带,表明待检样品中不含PEDV。自项目技术开发以来,已在温氏集团内各主要养猪公司得到应用。该技术自推广以来累计减少经济损失 121 2.76 万,该技术的应用提升了温氏集团疾病诊断的水平,有利于及时制定相应的防控措施,减少因疾病发生而产生的损失,对保障养猪业的平稳生产起到重要作用。

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