[00333742]临床与环境微生物分类鉴定方法的相关研究

1. 临床与环境微生物分类鉴定方法的改进、更新和创新 1.1 细菌分类研究方面 1.1.1贵州地区临床细菌分类研究： 首次在贵州地区进行了病原性放线菌及其它细菌分子分类、基因组及蛋白质组学分类与致病相关性的调查研究工作,研发出国内领先可同步检测鉴别不同放线菌属的诊断试剂盒。 1.1.2贵州地区环境细菌分类研究： 应用系统分类方法对贵州地区土壤需氧放线菌及其它细菌等多样性进行了分析,为建立贵州地区需氧放线菌系统发育数据库、探讨放线菌在自然分类系统中的进化关系、揭示菌属各种间本质特征奠定了基础,为将来新药研发及环境污染处理提供新的线索及菌株资源。 1.1.3极端环境放线菌分类研究方面开创性成果： 极端环境放线菌多相分类研究的系列技术方法,发展并完善特殊功能微生物的富集、分离和培养等技术。设计稀有放线菌的分离方法,通过设计、改良几种培养基,使放线菌分离率增加至80-90％。 1.1.4建立放线菌与真菌菌种保存库： 采集不同区域自然、生活环境及我省各地区临床感染及疑似标本,通过系统进化分析,初步建立贵州省放线菌种及病原真菌菌种保存库,为今后临床感染性疾病的致病机理及新型抗菌物质开发等提供新的菌株资源。 1.2.真菌分类方面的研究 1.2.1微卫星基因型分类研究： 1)首次利用全基因组重测序法对隐球菌微卫星毒力差异基因型菌株进行了毒力相关基因分析。 2)调查贵州地区感染VVC的白念珠菌CAI 区微卫星基因型分布及与当地VVC流行病学之间的关系; 描述贵州省酵母菌感染的流行病学特点,为临床诊断治疗提供有力依据。 3)首次发现微卫星基因型分类方法较其他基因分类方法更能精细展示、描述酵母菌来源、毒力与相关微卫星基因型的关系。 4) 对马尔尼菲青霉菌微卫星基因多态性及分子流行病学进行分析,从微生态遗传基因层面揭示该菌在地域间分子流行病学特点,为防治及治疗提供了依据。 1.2.2分子分类与致病机理相关性研究： 1)研究外阴阴道念珠病患者与健康带菌者口腔及阴道分离的念珠菌对氟康唑、伊曲康唑敏感性与微卫星CAI基因型之间的关系,发现引起外阴阴道炎的白念珠菌ERG11基因与唑类药物敏感性及基因型之间的关系。 2)报道一个以前未知的锌指转录因子Ofi1,首次探讨其在白念珠菌白-灰菌形态转换及菌丝生长中的作用。 3) 发现在白色念珠菌的天然MTLa /α分离株中的灰-白菌转换对宿主适应,发病机制和性别中的作用的进化影响。 4)首次在国际水平上揭示了新生隐球菌微卫星基因型与毒力差异之间的相关性。对深入了解新生隐球菌在环境-宿主之间传播过程毒力基因突变、发病机制,有效控制其传播和降低死亡率,开发新药物等提供了理论依据。 5)对贵州地区临床常见病原真菌种类及分布特点进行调查,采集临床不同来源和不同微卫星基因型的白念珠菌,构建小鼠模型进行毒力检测,发现白念珠菌感染与肿瘤形成存在一定相关性。 1.2.3. 快速鉴定分类方法研究： 建立病原酵母菌SSCP指纹图谱和基因型分析技术方法体系,首次明确病原酵母菌来源、毒力与微卫星基因型之间的关系,发表了一种在临床上可以大量鉴定筛选菌种的快速高效鉴定方法。 2. 临床与环境微生物分类鉴定方法的应用 2.1新种发表 项目组先后在国际微生物分类主流期刊上发表各类微生物资源,包括环境与临床真菌及放线菌等19个新种。 2.2. 分类代谢产物研究成果 2.2.1真菌代谢产物研究 1)利用微生态环境分类研究成果,筛选和分离出分泌高效水解丟糟蛋白酶的真菌,大大加速丢糟降解率,提高发酵产气质量。 2)发现抗真菌链霉菌发酵液具有抗稻瘟病、灰霉病的作用,效果稳定而持久,具有开发新型、高效、无毒天然农药的巨大潜力。 2.2.2放线菌代谢产物研究 1)从极端环境中分离出链单孢放线菌属菌株的发酵液中分离出木聚糖酶,在工业、环保、食品、医药等领域中有广阔应用前景。 2)发现从多孢放线菌发酵液中分离化学成分具有抗肿瘤、抗菌作用,临床可用于敏感菌所致感染及合成新一代抗菌药物的前体物质。