[00333650]全身性炎症反应综合征患者血清C 反应蛋白及其基因型检测的临床意义

一、任务来源：全身性炎症反应综合征患者血清C反应蛋白及其基因型检测的临床意义课题是唐山市科技局2008年度科学技术研究与发展指导计划项目,课题编号：08130206c. 二、应用领域和技术原理：本研究课题应用乳胶免疫比浊法检测其血清中高敏C-反应蛋白含量,应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态法检测其1059G/C基因型。所有资料应用SPSS10.0统计软件进行统计学分析。应用于唐山市工人医院、唐山市协和医院及华北煤炭医学院附属医院明确诊断为SIRS的患者220例,分为发热和不发热二组,健康对照组80例。其研究结果对于及时有效地治愈各种炎症产生极大地推动作用,有助于缩短发热病程,改善愈后,有助于对疾病进行支持诊断、病情检测、指导治疗,有利于本领域知识的创新。 三、课题目标完成情况： 1、应用乳胶免疫比浊法检测血清CRP含量,结果显示入院时发热患者CRP升高水平明显高于不发热患者。两组患者比较,CRP升高持续时间,一周及两周后CRP均值均有显著差异。见表： 分组 例数 XCRP±S （mg/l） 入院时 入院后1周 入院后2周 未发热SIRS发热性SIRSt’ 值P 值 110 10.05±8.62 4.93±5.68 1.20±2.90110 27.61±8.22 18.16±6.63 9.75±3.16 6.100 7.124 9.816 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 2、按照聚合酶链反应－限制性片段长度多态法（PCR－RFLP）进行操作,根据限制性内切酶Mae Ⅲ酶切结果显示,三组人群CRP1059G/C基因型均表现为GG、GC、CC三型,两组炎症患者及正常对照组CRP基因型分布经X2检验其X2值为2.226,P＞0.05,三组比较无显著差别。见表： 分组 例数 基因型 CC GG CG 未发热SIRS发热性SIRS对 照 组 X2值 P值 110 4（3.64） 87（79.09） 19（17.27） 110 2（1.82） 88（80.00） 20（18.18） 80 3（3.75） 62（77.50） 15（18.75） 2.226 ＞ 0.05 3、根据以上基因型分析结果得出,两组炎症患者及正常对照组CRP等位基因G、C分布分别经X2检验其X2值分别为1.495及0.415,P均＞0.05,三组比较CRP等位基因G、C分布无显著差别。见表： 分组 例数 等位基因 G C 未发热SIRS发热性SIRS对 照 组 X2值 P值 110 106（82.17） 23（17.83） 110 108（83.08） 22（16.92）80 77（81.05） 18（18.95） 1.495 0.415 ＞ 0.05 ＞ 0.05 4、在以上300例研究者中,GG基因型者共计237例,其CRP均值23.21±11.06 mg/l,GC基因型者共计54例,其CRP均值14.07±10.75 mg/l,CC基因型者共计9例,其CRP均值10.24±10.54 mg/l,对它们通过t检验进行两两比较,GG基因型者与GC基因型者,t值为5.091,P＜0.01,两组比较CRP均值存在显著差异;GG基因型者与CC基因型者,t值为4.048,P＜0.01,两组比较CRP均值存在显著差异;而GC基因型者与CC基因型者比较,t值为1.309,P＞0.05,两组比较CRP均值未见显著差别。 见表基因型 例数 XCRP±S t P GGGCCC 237 23.21±11.06 5.019* ＜0.01 54 4.07±10.75 1.309** ＞ 0.05 9 10.24±10.54 4.048*** ＜0.01 注 “*”GG与GC比较;“**”GC与CC比较; “***”GG与CC比较。 5、结论：两种炎症患者中发热患者CRP升高水平高于不发热患者。前者CRP持续时间长于后者。 二种炎症患者及正常对照组CRP1059G/C基因型与等位基因分布无显著差异。不同基因型者间CRP升高均值水平比较有差别,GG基因型者CRP均值水平高于GC、CC型者,但GC、CC型者之间无显著差异。 四、与国内外同类技术比较：随着分子生物学和免疫学的发展,许多灵敏、准确而简便的检测手段的相继问世,对CRP的研究进展也开始迅速发展。目前国内外越来越多的研究数据表明CRP不仅是炎症感染、组织损伤、坏死和恶性肿瘤的一个非特异性和敏感指标,而且动物模型实验表明还具有一定的治疗作用,但主要集中在感染性疾病、心血管疾病的诊断、预后等方面,本研究通过检测CRP含量及其基因型,探讨其在SIRS患者发热与不发热组之间的差异;首次探讨CRP1059G/C基因型与SIRS、发热与非发热炎症之间的关系,在国内尚属首例。而且可以监测CRP在SIRS患者发病病程中的变化。为以后研究CRP与特异性致炎因子如细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等之间的关系奠定基础。 五、成果的创造性、先进性选择研究对象并论证其科学性、创新性、实用性及统计学意义。遵循真实、准确、可靠、实事求是的原则。检测CRP含量基因基因型,其过程涉及乳胶免疫比浊法、聚合酶链反应-限制性片段长度多肽法,限制性内切酶、核酸电泳、印迹技术、探针杂交等技术的综合应用。统计学处理方面的技术：应用SPSS10.0软件进行统计学分析,基因型和等位基因频率分布采用直接计数法统计,基因型和等位基因频率组间比较采用四格表检验和R×C X2检验,计量资料采用均数--X±S,以t及t’检验,P＜0.05为有统计学意义。 六、作用意义：我院自开展CRP及其基因型及等位基因检测以来,提高了患者对疾病的认识,也提高了家属对疾病的预防意识。通过临床观察,我们体会到CRP检测方法简便实惠,结果准确可靠,对于CRP明显升高且基因型为GG型的患者,早期加强对疾病的治疗力度,对患者家属采用必要的防病措施,大大地缩短了病程,提高了治愈率,减轻了家庭的经济负担,节省人力及财力。另外,根据以上结果,还可以估计病原微生物,指导临床调整治疗重点。值得临床大力推广应用。 推广应用前景与措施 CRP是由细胞因子IL－6诱导肝脏合成的一种典型的急性时相蛋白,目前国内外越来越多的研究数据表明CRP不仅是炎症感染、组织损伤、坏死和恶性肿瘤的一个非特异性和敏感指标,而且还具有一定的治疗作用,对CRP的研究进展也开始迅速发展。CRP的临床应用价值又引起人们的特别关注,特别是它在检测感染性疾病、心血管疾病的诊断、检测、预后及实验室检测方面具有重要的临床应用前景。具体有： 1、在外科手术中的应用：外科手术切除炎症、器官或恶性组织时,机体的免疫系统往往容易受损,使病人容易发生继发感染,CRP可以作为早期外科炎症感染、术后并发症的早期监测和预后判断的指标。 2、在心血管疾病的应用：CRP在心血管疾病方面的研究最多也最深入,大量临床资料和实验室研究表明,CRP参与了动脉粥样硬化形成的病理和生理的整个过程。现在,CRP广泛应用于心血管疾病的诊疗中,随着高敏CRP（hs-CRP）检测技术的发展和研究的深入,检测CRP浓度可以低至0.1mg/L,且高敏CRP性质稳定,无年龄和性别等方面差异,检测方便无特殊要求,故在心血管方面的研究更加广泛。 3、CRP可以指导抗生素用药：CRP可以更快地反映炎症地变化,恢复,所以可以很高地评价抗生素的疗效;CRP可以预测疾病地严重程度,故动态监测可以作为是否使用抗生素治疗的可靠依据;CRP可以用于鉴别细菌或非细菌感染,指导临床治疗;结合本研究结论,可以继续结合病原微生物检测研究不同炎症间CRP水平及其基因型异同。 4、自身免疫性疾病方面：由于ESR受很多因素的影响,无法很好的反应炎症程度,而CRP与自身免疫性疾病的相关性很好,故应用很广。 5、其他方面：CRP与其他肿瘤标志物联合检测可以对癌症进行诊断和判断病情。 综上所述,尽管有关CRP的功能尚不完全清楚,但通常认为CRP是一种清除蛋白,主要在宿主先天防御和抗炎方面发挥重要作用。随着对CRP和hs-CRP的生物特性、生理功能、药理作用和临床作用的深入研究,CRP越来越广泛的应用于临床,前景越来越广泛,对于我们医学工作者要特别重视hs-CRP与其他项目联合检测的临床价值,尽快建立适合我国国人的CRP检测及应用标准,是它更好地为广大患者服务。