[00333642]Th1/Th2分化调节在人芽囊原虫感染小鼠模型中的机制研究

人芽囊原虫是一种导致人类腹泻的重要机会致病原虫,其免疫及致病机制尚未完全阐明。本课题组在前期研究发现：广西南部沿海地区居民人芽囊原虫感染率高达26.35%,高于其他地区,而感染人群的临床表现从无症状到间歇性腹泻至经常性腹泻;在小鼠动物模型中我们发现：人芽囊原虫可引起肠黏膜不同程度的炎性改变,相关免疫细胞和细胞因子检测结果提示原虫感染早期主要发生Th1应答,之后向Th2应答漂移,由此我们推测：Th1/Th2分化失调可能是该虫致病的主要原因。 我们完成了人芽囊原虫的分离和纯化培养,证明广西境内至少有3种基因型虫株,并成功构建了人芽囊原虫感染SD大鼠模型;其次,我们动态观察免疫抑制SD大鼠感染模型的肠黏膜病理损伤,结果显示：未发现人芽囊原虫感染SD大鼠模型的肠道粘膜病理损伤。我们观察了Th1/ Th2相关细胞因子在全肠道组织的表达变化,结果显示：回肠中的IFN-γ的mRNA与对照组相比,在7d和21d时与表达上调（P＜0.05）,IL4的 mRNA与对照组相比, 在7d和21d时表达下调（P＜0.05）;结肠中的IFN-γ的mRNA与对照组相比,21d时表达上调（P＜0.05）,IL4的 mRNA与对照组相比,在14d和21d时表达上调（P＜0.05）;在回肠派氏结中的TNF-α的 mRNA与对照组相比,在7d和14d时表达上调（P＜0.05）。同时,我们还动态观察了免疫抑制SD大鼠感染模型的肠道和回肠派氏结中TLR2和TLR4受体的表达情况,结果显示：与对照组相比较,回肠派氏结中TLR2的mRNA在14d和21d时表达上调（P＜0.05）,而在盲肠组织中TLR4 mRNA在7d表达下调（P＜0.05）,在回肠派氏结中TLR4的mRNA在14d和21d时与对照组相比,表达上调（P＜0.05）。 本项目的研究结果将为人芽囊原虫致病性、免疫调节机制等的后续研究工作打下扎实基础。目前存在的主要问题是人芽囊原虫的致病力较弱,具有一定的宿主选择性,同时体内增强或减弱Th1/Th2免疫应答的动物模型构建较为困难,有待构建合适的动物模型,以进一步阐述 Th1/Th2分化调节在人芽囊原虫感染中的作用。 在研期间发表文章： 1、2014年《广西在校大学生人芽囊原虫分离株基因型的初步研究》。 2、2015年《Comparative analysis of intestinal parasitic infections of outpatients in Guangxi medical university affiliated hospital in 2005 and 2013》。 3、2015年《南宁12313例医院就诊者肠道寄生虫感染状况分析》。 4、2016年《广西两所三甲医院住院患者人芽囊原虫感染调查》。 5、2017年《A novel genotype screening and phylogenetic analysis of Blastocystis hominis based on EF-1α》。 6、2017年《人芽囊原虫感染的研究进展》。 7、2017年《人芽囊原虫体外纯培养法的改良及形态观察 》。 8、2018年《mLES法培养人芽囊原虫的实验观察》。