[00333579]自噬对顺铂抑制胃癌细胞生长的作用研究

课题来源：江西省青年科学基金,结题时专家同行评议为“优” 研究背景：胃癌是我国我省最常见的肿瘤之一,恶性腹水是胃癌常见的并发症,预后极差。腹腔内灌注化疗药物顺铂是临床治疗恶性腹水的常用方法,但效果不理想。新近研究表明,自噬在抗癌过程中起了重要作用,顺铂作用于肺腺癌细胞引起的自噬反应能使肿瘤细胞存活。 研究内容： （1）回顾性研究了胃癌恶性腹水患者的病理特征与临床预后,总结了顺铂联合伊立替康二线治疗晚期胃癌的疗效,探讨了血清肿瘤标志物诊断胃癌腹膜转移的价值; （2）在细胞水平研究自噬对顺铂抑制胃癌生长的作用：培养胃癌细胞系 SGC7901,设置空白对照和氯喹对照组,将顺铂±氯喹作用于胃癌细胞,观察和检测细胞的生长、自噬与凋亡; （3）探讨顺铂影响胃癌细胞自噬的分子机制：检测胃癌细胞顺铂±氯喹两组自噬相关基因/蛋白表达的变化,阐明顺铂影响胃癌细胞自噬的可能分子机制; （4）在动物水平研究自噬对顺铂抑制胃癌生长的作用：建立胃癌细胞 SGC7901 的皮下种植瘤模型,设置空白对照和氯喹对照组,往裸鼠腹腔内注射顺铂±氯喹,观察和检测肿瘤生长、细胞自噬与凋亡; （5）临床研究自噬对顺铂腹腔化疗疗效的影响： ①入组 35 例经病理和脱落细胞学确诊的胃癌恶性腹水患者,腹腔内灌注顺铂,依据 WHO 标准评价疗效; ②根据临床疗效分成无效组（No response,NR）和有效组（Objective sponse,OR）,收集腹腔灌注化疗前、后腹水,检测 NR 组和 OR 组腹水脱落癌细胞 Beclin-1 和 Bcl-2 mRNA,分析 Beclin-1 mRNA与顺铂疗效的关系。 研究成就： （1）初步掌握了自噬检测的常用方法; （2）系统回顾性分析了江西省肿瘤医院和南昌大学第四附属医院胃癌恶性腹水患者的临床病理特征和预后,随访获得了患者的生位生存时间及其影响因素,相关文章发表在 SCI 收录《Tumor Biology》,总结顺铂联合伊立替康二线治疗晚期胃癌的疗效,研究结果发表在《肿瘤防治研究》,探讨了血清肿瘤标志物诊断胃癌腹膜转移的价值,成果发表在《广西医学》; （3）通过体内外实验揭示了顺铂能诱导胃癌细胞保护性自噬,自噬抑制剂氯喹增强了顺铂对胃癌的杀伤力,相关文章分别发表在《中国肿瘤临床》、《中华临床医师杂志（电子版）》和 SCI 收录《Asian Pacific Journal of Cancer Prevention》; （4）通过顺铂腹腔灌注治疗胃癌恶性腹水,发现治疗有效者以细胞凋亡（Bcl-2 降低）为主,而治疗无效者以细胞自噬（Beclin 1 mRNA 升高）为主,研究成果发表在《肿瘤防治研究》; （5）上述文章多数被他人正面引用,体现了研究成果的价值。 取得成果： （1）学术成果：通过本研究证实顺铂诱导胃癌细胞自噬的产生,自噬降低了顺铂抑制胃癌生长的作用,加用自噬抑制剂氯喹后,增强了顺铂的抗癌能力,经成果查新评定为国内先进; （2）论文成果：已发表 SCI 收录文章 2 篇（影响因子总和4.34）;北大中文核心目录文章 4 篇,科技核心期刊 2 篇; （3）学术交流：参加国内学术会议 1 次,省内学术会议 1 次,增进了地区交流,提高江西地区的科研水平; （4）人才培养：本课题受青年科学基金资助,明显提高了项目负责人的科研素质,获“赣鄱肿瘤学明日之星”称号,同时也培养了 1 名在职硕士研究生的实验技术能力; （5）后续研究：课题延伸内容获得了2015年国家自然科学基金资助（No.81460372）。