交易价格： 面议
类型： 非专利
交易方式： 资料待完善
联系人：
所在地：
课题来源：山东省经济和信息化委员会2013年度山东省第一批技术创新项目计划（项目编号为：201310507013） 课题名称：利用基因工程技术构建新赖氨酸重组菌株的研发 课题起止时间：2013年01月至2014年12月 研究目的与意义：本课题响应国家政策,着眼于未来,率先在国内利用谷氨酸棒杆菌自主开发产赖氨酸生产菌株,并采用先进的基因工程技术手段进行育种。通过在细胞和分子水平上研究赖氨酸代谢途径调控机制,结合公司现有发酵生产菌株大肠杆菌,以谷氨酸棒状杆菌模式菌株ATCC13032为出发菌株,利用基因工程手段构建赖氨酸生产菌种,与传统诱变育种相比,改造的方向和性质明确,不易产生回复突变,多种途径结合可获得遗传性状稳定的高产工业菌株。 本项目用谷氨酸棒杆菌作为产赖氨酸菌株的出发菌株的育种研究;育种方式采用基因工程手段,如基因敲除、启动子替换、核苷酸突变等,未采用传统诱变方式;实现对出发菌株的无痕操作,不会引入任何标记基因,如抗生素基因等。 主要论点及依据：谷氨酸棒杆菌是革兰氏阳性菌,细胞壁较大肠杆菌负复杂,感受态细胞的制备需在甘氨酸和吐温80的作用下使细胞壁疏散,从而增加细胞壁的透性。针对谷氨酸棒杆菌的重组质粒pk18mobsacB也得以构建,pk18在谷氨酸棒杆菌中为单拷贝,同时该质粒具有卡那霉素抗性,对谷氨酸棒杆菌细胞壁的形成没有干扰作用,第三该质粒含有来自于枯草芽孢杆菌的sacB基因,该基因表达蔗糖果聚糖酶催化蔗糖生成果糖,进而聚合为大分子的聚果糖,从而在含有单一碳源蔗糖的培养基中抑制细胞的生长。因此通过pk18mobsacB携带重组片段电转化受体细胞后可通过第一步卡那霉素的正向筛选和第二部蔗糖的反向筛选实现DNA的无痕重组。该技术可对绝大多数基因实现高效率敲除或敲入操作。 创新性：本课题以野生型谷氨酸棒杆菌作为出发菌株,通过分子克隆技术、DNA重组技术、生物信息学等基因工程手段,将具有效用的外源基因片段整合到出发菌株基因组,或改变其内源基因的核酸序列,人工调整细胞的代谢网络,使该菌株具有稳定的遗传性能和高产赖氨酸的能力。 历年获奖情况：荣获2015年潍坊市科技进步二等奖。
Copyright © 2018 宁夏回族自治区生产力促进中心 版权所有 宁ICP备11000235号-3 宁公网安备 64010402000776号
网站访问量： 网站在线人数：0 技术支持：科易网 
微信公众号
