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该研究在细胞研究的基础上进一步研究Smac在动物体内的作用机制。在细胞研究采用,RT-PCR、Western blot方法分别从基因和蛋白水平检测卵巢癌细胞系SKOV3及其耐药细胞系SKOV3／DDP中Smac／DIABLO与XIAP的表达水平的差异。通过成功构建Smac目的片段真核表达载体并转染卵巢癌耐药细胞系,提示Smac确实促进卵巢癌细胞凋亡,但其凋亡机制不是促进XIAP降解,而是与XIAP相互结合抑制其与caspase结合,激活caspase进而起到促凋亡作用。建立人耐药卵巢癌裸鼠移植瘤模型,将构建含Smac／DIABLO基因的靶向真核表达载体,注射入建立的卵巢癌裸鼠移植瘤模型中Western blot检测Smac、XIAP蛋白表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,免疫组化检测CD34微血管情况及smac,survivin的表达情况。动物实验中smac诱导survivin表达下调亦可能是其促凋亡的机制之一,smac质粒联合顺铂对耐药卵巢癌移植瘤生长抑制作用较单一用药显著,smac和顺铂对诱导耐药卵巢癌细胞凋亡有协同作用,smac’能减少卵巢癌微血管生成,这可能是其抑制肿瘤生长的另一原因
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