[00333005]从8-iso-PGF2α探讨中药预处理对酒精性脂肪肝保护机制

本研究是市科委资助的应用基础与前沿技术研究计划的重点项目,是前期益肝降脂方治疗脂肪肝和酒精性脂肪肝的临床研究的延续与深化。 WHO统计数据显示在过去30年,全球酒精性肝病患者人数从1000万剧增到1.3亿,预计到2025年全球酒精性肝病患者将达到2.5亿。现在我国的脂肪性肝病（FLD）患者多数是酒精性肝病（ALD）,ALD对肝脏健康的影响大于非酒精性肝病（NAFLD）,过量饮酒不仅是脂肪肝患者发生肝硬化的重要危险因素,亦可能加重药物性肝病、NAFLD以及慢性肝炎患者的肝脏损伤。酒精性肝病发现时多有并发症的出现,迄今尚无防治该病的特效药物。开发中医药治疗酒精性肝病的优势,尽早对早期酒精性肝损伤实施干预,减少或阻抑酒精肝发展成为当务之急。 药物性预适应是随着损伤性理论、实验、和临床进展产生并趋于完善的新理论和方法。通过课题组8年的不懈努力,在使用药物预处理的方法诱导或协助肝脏自身保护能力的临床与实验研究中做了一些探讨与尝试并取得一定成果。中医治疗关键是一个纠偏的过程,调节人体阴阳的动态平衡是机体健康的保证,与西医有关内稳态的理论和实践是一致的。中医药治疗重视整体观念,注重阴阳气血的关系,以改善机体对内外环境变化、刺激损伤的适应态,建立新的动态平衡为目的,这正是益肝降脂方进行研究的着眼点。 本课题自预实验摸索实验条件出发,充分利用动物实验证实了脂质过氧化反应可能是酒精性肝损伤诱发脂肪性肝炎和肝纤维化的重要机制,探究了益肝降脂方药不同时段的干预对酒精性脂肪肝的保护作用及其分子机制。 （1）设计独特把预处理的早期与延迟作用放大为酒精不同时段的刺激施行中药干预。 （2）病机阐发认为酒精肝病位虽在肝（络）,实为脾胃,由脾胃波及肝胆而致。脾胃升降失调,肝木失其疏泄,痰湿脂浊互结贯穿并影响酒精性肝病发生发展关键,故以升清降浊解郁为法,立益肝降脂方复升降润燥,运化水谷、分别清浊之功。 （3）指标标新立异 1引入测定体内氧化应激的金指标异前列腺（8-iso-PGF2α）评估酒精性肝损伤的效果; 2选择预适应保护的信号传导路径上触发物质-中介物质-效应物质（iNOS、PKCα、HSP70mRNA和蛋白）作为观测的核心指标。 本研究首次引入氧化应激指标8-异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）利用时段差别,从实验角度探究求证益肝降脂方药的干预效应;评估了该方对酒精性肝损伤抗氧化修复的效果及其量、时、效之间关系,部分揭示了益肝降脂方模拟或加强酒肝保护作用的分子机制;完成了该方对慢性酒精肝损伤的防护疗效及中药复方的治疗优势分析;同时对本方预处理激发内源性保护物质的作用机制及模拟加强肝缺血预适应样效应的分子生物学指标做了全面观测与分析;利用实验资源初步完成本方对肠道粘膜屏障预护效应的评估,从细胞分子水平探究了益肝降脂方预处理对酒精肝的保护机制,为开发防治稳定有效、低毒、高性价比的预防酒精肝的中药新药提供实验依据。培养和锻炼8名研究生, 5名走向工作岗位, 1名博士在读;研究过程共成文14篇,已见刊12篇,录用排版2篇,其中SCI收录1篇,EI收载11篇。 本研究过程反映了酒精肝氧化应激代谢过程的复杂性,实验的数据分析尤为重要,数据挖掘的工作量远超出本已经沉重的动物实验的工作量,成为该项研究的主体部分,在研究内容中只是相对充分体现。 我们体会在体应用实验模型评价药效是第一目的,但造模实验本身存在多环节,有复杂多样性,对药效作用的主途径、主靶点很难完全阐述清楚,应该降阶降解为离体和细胞模型,才能快捷、相对明确并可控的认知中药复方功效和作用机制,因此系统深入研究益肝降脂方的作用机制还可以体外实验及筛选有效组分群来实现,也是我们的研究方向。