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[00332786]应用竞争性杂交从早实枳变异分离克隆与矮化、早花有关的基因

交易价格: 面议

类型: 非专利

交易方式: 资料待完善

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技术详细介绍

收集早花变异枳材料,经扩繁后建成不同年龄时期、不同发育阶段的繁殖研究群体,通过改进的RNA 提取方法,分别从早实枳和普通枳春梢顶端数芽中提取高质量RNA 建立SSH 文库,该差减文库经报告基因检测具有较好的差减效率和装载信息容量;从差减文库中随机抽取了部分克隆进行测序,并与GeneBank 信息库进行比对,发现有与拟南芥花芽特异表达的基因同源,以及参与已糖激酶、钙调蛋白合成相关的一些调控基因在早实枳中增量表达,另外还分离到若干未知蛋白,其功能尚有待进一步验证;对植物成花网络调控几个重要节点基因的克隆比较分析表明,AP1 的保守性较高,在早实枳、普通枳及拟南芥间无差别,而FT 基因与温州蜜柑中的同源基因有2 处氨基酸变异;LFY 基因在核苷酸序列上早实枳与普通枳有17 处不同,与甜橙相比有53 处不同,大多发生于内含子区域,AA 序列上前二者有2 处不同,与甜橙有6 处不同,值得注意的是甜橙中76 位、217位氨基酸都是Met,而在枳中分别由Ile、Thr 代替,而Met 的编码核苷酸为AUG,同时也是ORF的起始密码,是否在甜橙的幼年树中可能出现这两位Met 被判读为起始密码而发生异位剪切,这一现象值得进一步研究。

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