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研究收集了胰腺癌及年龄性别相匹配的正常对照。初步采用单分子微阵列（Solexa）高通量小分子测序对两组病人的混合血清进行筛选,得出差异表达的血清miRNA,随后通过定量PCR（qRT-PCR）对初筛阶段差异表达的血清miRNA进行大规模、单样本、二阶段的精确定量验证。通过聚类分析、风险评分分析、曲线下面积分析评估该组血清miRNA表达谱对胰腺癌诊断的准确性及可靠性。另选取慢性胰腺炎作为第二对照,进一步验证该组标志物对胰腺癌病人和其高危人群慢性胰腺炎的区分能力。进一步选取样本（胰腺癌+正常对照）进行双盲实验验证,操作者与结果分析者均不知晓样本信息前提下进行实验及分析验证其诊断的准确性。另选取临床疑似胰腺癌的病例进行前瞻性分析,结合连续该组样本的临床病理诊断来评价该组血清miRNA作为胰腺癌诊断生物标志物的准确性。鉴定出的7个血清miRNA能够准确的区分胰腺癌与正常对照样本及慢性胰腺炎样本。进一步研发血清miRNA早期诊断胰腺癌的试剂盒,并在多家三甲医院开启临床研究,结果显示该组标志物可以改进单一的分子标志物所难以克服的低特异性和低灵敏度问题,能显著提高胰腺癌的临床检出率,成为早期诊断的有效手段。 同时,在前期血清miRNA的研究基础上,将其运用到胃癌、结直肠癌等危害程度大,早诊困难的疾病中。由于单一的常规血清标志物会在很大程度上造成肿瘤病人的漏诊,均低于我们研究结果中miRNAs的阳性率,一系列miRNA组合为一个多因子指标能够成为针对肿瘤的特异标志物,对高危人群进行筛选。课题组研究结果显示miRNAs的特异性和敏感性均较好,能够同时满足肿瘤早期诊断所需的高敏感性和特异性诊断要求。血清miRNA作为一种新奇的无创的肿瘤诊断和预后标志物具有良好的临床应用潜力。如能将血清miRNA推广应用于消化道肿瘤以及其他肿瘤的普查、筛查工作,及临床预后及疗效预测等领域,将可能带来未来临床医学上的变革。
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