[00332380]A激酶锚定蛋白12基因甲基化在肺癌发生与进展中的预警作用及相关机制研究

肺癌是癌症死亡的主要原因。全球正在积极探寻肺癌筛查与早期诊断的新技术与有效筛查路径。在当前肺癌治疗中,靶向药物层出不穷,免疫治疗方兴未艾,放化疗和手术仍占有重要作用。如何采用更个体化的治疗模式让患者获益？A激酶锚定蛋白12（AKAP12）是一种细胞支架蛋白,研究发现AKAP12在多种人类肿瘤中表达下调或缺失,展示了其作为抑癌基因的可能。本研究拟通过对肺癌组织、肺癌细胞系及肺癌干细胞AKAP12基因表达和甲基化水平检测,探明其表达下调或缺失的原因,通过外源性调节AKAP12表达变化探索其维持肺癌干细胞生物学特性的机制、作用以及其在肺癌发生发展过程中所扮演的角色;同时探讨外周血游离DNA甲基化水平检测在肺癌的诊断以及预测复发方面的重要意义。寻求肺癌早期筛查及综合治疗多靶点新模式。主要研究内容：AKAP12在肺癌组织中表达情况、甲基化水平测定,外周血游离DNA中AKAP12甲基化水平测定：对肺癌组织及其癌旁正常组织进行免疫组化分析、RT-PCR测定其表达情况,提取DNA后,通过MSP法对其进行甲基化水平以及亚硫酸盐法对启动子CpG岛不同位点甲基化频率测定。并分析AKAP12表达情况与甲基化、临床病理分期、病程进展、淋巴结转移关系。同时抽取病人外周血进行游离DNA的AKAP12甲基化水平进行检测。本项目创新点： 1：关于AKAP12影响肺癌及其干细胞功能的相关研究（通过研究和探索AKAP12对肺癌干细胞的功能的影响,可以进一步拓展肺癌干细胞中作用的复杂网络,明确AKAP12在肺癌干细胞中的作用及机制,为AKAP12与肺癌干细胞的关系深入研究提出新思路,为诊断、治疗肺癌提出新的思路）,国内未见相同文献报道。2：通过检测外周血中游离DNA的甲基化程度与各型肺癌标本中AKAP12的甲基化程度,并分析其相关性,确定其相关程度,为临床肺癌的早期诊断提供简单易行的方法,国内未见相同文献报道。本课题相关研究的科研产出及成果转化应用情况： 1.《Curcumin inhibits lung cancer invasion and metastasis by attenuating GLUT1/MT1-MMP/MMP2 pathway》 ,发表在Int J Clin Exp Med,2015;8（6）：8948-8957。 2.《Matrine suppresses invasionand metastasis of NCI-H1299 cellsby enhancing microRNA-133a expression 》,发表在Int J Clin Exp Med,2015;8（7）：10714-10722 。 3.《ARNT2 is downregulated and serves as a potential tumorsuppressor gene in non-small cell lung cancer 》,发表在Tumor Bio,（2015） 36：2111-2119。 4.《Piperine induces apoptosis of lung cancer A549 cells via p53-dependent mitochondrial signaling pathway》,发表在（2014）35：3305-3310。 5.《肺癌患者外周血AKAP12基因甲基化水平的检测及意义》,发表在重庆医学杂志,（2014）43：1834-1836。 6.《ERCC1、β-Tubulin Ⅲ在非小细胞肺癌中的表达及其与肺癌预后相关性研究》,发表在陕西医学杂志,（2015）44：801-804。 7.《肺癌组织中AKAP12基因的表达及临床意义》,发表在临床医学研究与实践杂志,临床医学研究与实践杂志,（2016） 1：11-18。 8.《肺癌组织中AKAP12启动子区域甲基化状态研究》,发表在《西藏大学学报》（自然科学版）,2016) 1：40-44。