[00306486]耐阿米卡星肺炎克雷伯菌分子流行病学特征与多药耐药关系的研究
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刘红
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随着广谱抗菌药物的广泛应用，肺炎克雷伯菌（Klebsiellapneumoniae，KP）对多类抗菌药物的耐药率都迅速增加，成为抗感染治疗的主要问题。2012～2016中国CHINET及我院细菌耐药性监测结果显示，KP对阿米卡星的耐药率较低都﹤12﹪。我们前期研究发现，耐阿米卡星肺炎克雷伯菌（Amikacinresistantklebsiellapneumonia，ARKP）都同时对多类抗菌药物耐药，ARKP引起感染在临床治疗中经常有治疗失败的现象，其原因是院内ARKP的耐药性非常严重。由于不同国家、不同地区、不同医院ARKP的流行菌株存在一定的差异，ARKP对各类抗菌药物的耐药机制和分子流行病学特征也不尽相同。研究分析院内ARKP多重耐药机制及流行原因，对防止耐药菌株的产生，预防其爆发流行，提高因ARKP引起严重感染的治愈率至关重要。
本研究收集2013年6月～2014年11月期间临床分离的27株非重复ARKP作为研究对象，
用PFGE和MLST对ARKP进行亲缘性关系分析，细菌药敏采用NC50药敏板、纸片扩散法和E-test条检测菌株对阿米卡星等抗菌药物的耐药性，用PCR法检测40种β内酰胺类、11种氨基糖苷类、4种质粒介导的喹诺酮类、消毒剂耐药基因qacE△1及整合子在27株ARKP的分布情况。接合试验检测ARKP相关耐药基因在不同菌种间传播情况。采用特异性PCR扩增和序列分析证实各种PCR阳性相关耐药基因分布情况，并对序列进行分析。综合分析ARKP分子流行病学特征及对多类抗菌药物同时耐药的原因，为临床抗菌药物的使用及控制院内感染提供依据。研究结果发现:⑴2013年6月～2014年11月间，产16SrRNA甲基化酶RmtB、ST11型和ST37型ARKP是泰安市中心医院院内的主要克隆流行株。E谱型、ST11型是产KPC-2型ARKP中的一个主要克隆类型，在医院内和医院间都发生过克隆株的暴发流行。⑵ARKP中，100%携带氨基糖苷类耐药基因，其中16SrRNA甲基化酶基因RmtB是引起阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素都高水平耐药的主要原因，其次是aac（6′）-Ib基因。喹诺酮类耐药基因qnr阳性率为74.1﹪，是引起喹诺酮类药抗菌药物MIC值升高的重要原因。⑶ARKP中，KPC-2碳青霉烯酶是引起亚胺培南、美罗培南和厄他培南耐药主要原因，其次是NDM-1金属酶。81.5％的ARKP产超广谱β内酰胺酶，是ARKP对头孢菌素类抗菌药物性重要原因。⑷ARKP中，消毒剂耐药基因qacEΔ1阳性率为92.59%，是MDRAB对消毒剂耐药的主要原因。同时携带3类和2类抗菌药物相关耐药基因，是ARKP对多类抗菌药物同时耐药的重要原因。⑸ARKP整合子中，62.96﹪都检出16SrRNA甲基化酶基因RmtB，是ARKP对氨基糖苷类耐药性增加的重要原因。接合子都检出CTX-M超广谱β内酰胺酶，整合子、质粒是ARKP耐药基因扩散和多重耐药的重要原因。
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