[00303145]一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
交易价格:
面议
类型:
发明专利
技术成熟度:
正在研发
专利所属地:中国
专利号:CN201510918697.5
交易方式:
完全转让
联系人:
江南大学
所在地:江苏无锡市
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技术详细介绍
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。