[00303111]一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用

交易价格： 面议

类型： 发明专利

技术成熟度： 正在研发

专利所属地：中国

专利号：CN201110289796.3

交易方式： 完全转让

联系人：江南大学

所在地：江苏无锡市

服务承诺: 产权明晰; 资料保密
对所交付的所有资料进行保密; 如实描述

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技术详细介绍

摘要：一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pet-28a-lpgad的构建方法及其应用，属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化l-谷氨酸产gaba上的应用。首先，pcr扩增获得植物乳杆菌gb 01-21谷氨酸脱羧酶(gad)基因，构建了重组质粒pet-28a-lpgad，并在 bl21(de3)成功表达，其次，粗酶液采用ni柱亲和层析纯化获得重组gad，并对其酶学性质进行初步研究，用于指导转化条件的优化。最终5l发酵罐上进行转化实验，gaba累积浓度可达204.5g/l，摩尔转化率为97.92％，为进一步工业化应用打下了良好的基础。

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