[00294356]鸭T细胞主要功能性亚群及其细胞因子的研究(登记)
交易价格:
面议
类型:
非专利
技术成熟度:
正在研发
交易方式:
完全转让
技术入股
许可转让
联系人:
林念文
所在地:宁夏回族自治区
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资料保密
对所交付的所有资料进行保密
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技术详细介绍
任务来源:黑龙江省科技厅留学回国基金 项目编号:LC0.002C0.008 项目名称:鸭T细胞主要功能性亚群及其细胞因子的研究 应用领域:本项目建立可稳定分泌抗鸭T淋巴细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株,获得的单克隆抗体可识别鸭T细胞,并建立了检测鸭T细胞的方法,对进一步研究鸭T细胞的免疫生物学特性和体内外功能具有重要意义。同时克隆了鸭IFN-α、鹅IFN-α、γ及鹅IL-1、2基因,制备了重组鸭IFN-α和鹅IFN-α、γ,并初步评价了上述重组细胞因子的生物学活性,为进一步揭示这些细胞因子的免疫学功能提供试验数据,为研制鸭、鹅细胞因子生物制品奠定物质基础。 技术原理:本项目利用细胞融合技术及建立的间接ELISA方法筛选了5株稳定分泌抗鸭T淋巴细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并利用免疫组织化学染色技术建立了检测鸭T淋巴细胞的方法。利用RT-PCR方法克隆了鸭IFN-α、鹅IFN-α、γ及鹅IL-1、2基因,构建了鸭IFN-α、鹅IFN-α、γ基因的原核表达系统和昆虫细胞杆状病毒表达系统,上述基因均获得了表达;并利用细胞病变抑制试验、噬斑减数试验及NO试验评价了重组IFN的生物学活性。 性能指标:利用5株单克隆抗体示踪了正常鸭机体T淋巴细胞的分布及发生规律,其中4株识别成熟的T淋巴细胞和树突状细胞,1株识别成熟的T淋巴细胞和B淋巴细胞以及上皮细胞。制备的重组鸭IFN-α、鹅IFN-α、γ均具有抗病毒活性,原核表达的重组鹅IFN-α具有比原核表达的重组鹅IFN-γ更高的抗病毒活性;糖基化修饰对重组鹅IFN-α、IFN-γ的生物学活性是非必须的。NO试验结果表明重组鹅IFN-γ具有MAF活性。 综上所述,该项目实施过程中共申报国家发明专利2项,发表论文14完成了篇,其中SCI收录论文2篇,分泌抗鸭T淋巴细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞5株,表达重组鸭IFN-α、鹅IFN-α、γ基因工程菌3株,表达重组鸭IFN-α、鹅IFN-α、γ的杆状病毒3株。完成了项目合同任务要求的性能指标,整体研究成果达到国内领先进水平。