[00291605]应用荧光定量PCR方法检测医院院内感染重要致病菌-铜绿假单胞菌特异性基因(登记)
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面议
类型：
非专利
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正在研发
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联系人：
林念文
所在地：宁夏回族自治区
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技术详细介绍
本课题来自黑龙江中医药大学。铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa PA）是假单胞菌属代表菌种。自然界分布广泛，存在于土壤，空气，污水，皮肤和人体与外界相同的腔道如肠道，呼吸道等处。在家庭环境中很少培养到，经常存在于医院环境中，为医源性或医院内感染的重要致病菌。铜绿假单胞菌对外界环境抵抗力强，在潮湿环境中易繁殖，可长期生存，潮湿的开放创面适宜该菌生长，对干燥也有抵抗力。将临床送检的细菌培养标本，用常规分离培养的方法进行菌株的生化性状鉴定，同时应用分子生物学检测技术，选择特异性的引物段，进行特异的基因片段扩增及荧光定量分析。首先，应用小量快速提取法，提取核酸片段，然后应用荧光定量PCR检测技术，进行检测。从而能够快速准确的进行细菌的鉴别诊断。1.找到一种小计量（2ug）优质纯化的提取铜绿假单胞菌特异性基因片段的方法。2. 找到铜绿假单胞菌不同于其他化学化工<其它化学化工肠杆菌科细菌的特异性基因片段，制作一对特异性引物。3.应用荧光定量实时检测PCR技术，从而达到快速、微量、早期、准确、特异的诊断铜绿假单胞菌临床感染的目的。4.准确的排除其它细菌的假阳性结果。从而创造出早期诊断医院院内感染常见菌铜绿假单胞菌的方法和确定该菌耐药的情况。用来指导临床正确、科学、合理的选择抗生素药物，降低医疗成本，节约医疗资源，减轻患者的经济负担。荧光定量PCR方法是检测病毒、细菌的最快速、微量、早期、准确的方法。具有很强的特异性和灵敏度，但至今还没有人把它用于院内感染的早期安全防护<监控。本课题通过对PA的荧光定量检测的研究，来探讨比较它的特异之处，荧光定量PCR所用时间仅为5至6小时，而普通细菌培养所需时间常常要48至72小时或更长的时间。这样就大大的缩短了检测时间，为临床合理用药提供了宝贵的时间，避免了由于盲目用药而引发的多重耐药和院内感染传播。提高临床感染的治愈率，控制院内感染的发生。并且其成本也大大低于普通细菌培养鉴定，若此项研究广泛应用于临床，必将提高临床感染的治愈率，而且为患者减少医疗费用，获得可观的经济效益和良好的社会效益。具有极好的应用价值和推广前景。
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