[00281052]用于T-A克隆的T载体制备方法
交易价格:
面议
类型:
发明专利
技术成熟度:
正在研发
专利所属地:中国
专利号:CN200510123112.7
交易方式:
完全转让
许可转让
技术入股
联系人:
南京大学
所在地:江苏南京市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
本发明公开了用于T-A克隆的T载体制备方法,选择一个高拷贝数的常用质粒,以此质粒为模板设计四对引物,通过定点突变构建两种在特定序列有差异的突变质粒;在两种突变质粒的多克隆位点处分别构建TTTTAAA及TTTAAAA序列盒,并分别引入两个不同的酶切位点BamHI和HindIII;将突变质粒分别导入细菌扩增,并将扩增的等量质粒用可识别TTTAAA序列的内切酶切割,混合、变性、复性,反应后的混合物酶切,去除亲本分子,即可分离出T载体。本发明采用独特的生物合成技术生产T载体,这种由生物合成的天然T载体,具有合成方便,生产成本低,克隆效率高,质量稳定等特点,用本方法构建的T载体完成了多个基因的克隆,结果表明其重组效率达到了90%以上。