本项目以牛用疫苗生产中最常用的MDBK细胞为研究对象，重点开展MDBK细胞的低血清或无血清悬浮驯化培养，无血清细胞液氮保存培养基等技术研究，同时开展了奶牛乳房炎大肠杆菌工程菌开展高密度发酵培养工艺和蛋白纯化工艺等研究。经过适应驯化培养，成功建立了MDBK细胞低血清和无血清悬浮培养技术，获得了适应无血清悬浮培养的MDBK细胞，可应用于BVDV、旧RV等的增殖培养及牛病毒性疫苗产品的研发。筛选出对MDBK细胞具有较好保护效果的无血清冻存液；复苏细胞存活率达到92%以上,细胞生长稳定。建立了奶牛乳房炎基因工程亚单位疫苗停乳/GapC和金葡/GapC大肠杆菌工程菌的液体深层发酵培养工艺。重组停乳/GapC蛋白、金葡/GapC蛋白及混合/GapC蛋白免疫小鼠和牛安全性好。免疫小鼠产生了良好的体液免疫和细胞免疫应答，停乳和金葡混合/GapC蛋白疫苗对S.agalactiae、S.dysgalactiae、S.uberis、S.aureus的攻击具有较好的免疫保护作用，金葡/GapC蛋白对S.aureus攻击具有较好的免疫保护作用。该成果已在黑龙江部分生物制品企业和养殖场进行了推广应用。累计新增利润2960万元。该成果提供了大肠杆菌工程菌的液体深层高密度发酵培养工艺、MDBK细胞低血清和无血清悬浮培养等新技术。克服了缺乏MDBK细胞悬浮培养技术和大肠杆菌工程菌高密度发酵培养工艺等问题，改进了产品生产工艺，提高了产品质量，为生产高质量牛用生物制品提供了技术支撑，推广应用前景广阔。