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绒山羊源大肠杆菌特异性噬菌体的功能研究

所属分类:优质粮食及地方特色产业

所属单位:榆林学院

联系人:-

联系方式:0951-6087161 /5020588

所在地:

成果简介

本项目研究首先利用聚乙二醇-氯化钠(PEG 8000-NaCl)浓缩噬菌体φPTK后采用透射电子显微镜观察其超微形态结构;其次,采用苯酚-氯仿法提取噬菌体φPTK核酸后通过Illumina HiSeq高通量测序分析其全基因组结构特征,Mauve软件进行比较基因组学分析,MEGA软件绘制噬菌体进化树;最后,通过构建小鼠感染模型,分析噬菌体φPTK对小鼠感染大肠杆菌的防治效果。本项目研究结果表明:1)透射电镜显示噬菌体φPTK头部为正多面体形,直径90 nm;有一可收缩的长尾,长约112 nm,直径约为18 nm;2)噬菌体φPTK基因组全长169,688 bp,G+C含量37.72%,有264个开放阅读框(ORFs),含穿孔素-裂解酶(Holin-Lysin)裂解系统,具有抗穿孔素蛋白和裂解抑制辅助蛋白,未发现抗生素耐药基因和毒力基因,噬菌体φPTK全基因组序列已经上传至GenBank数据库,登录号为MW512264-MW512267;比较基因组分析确定该噬菌体为一株新的绒山羊源大肠杆菌烈性噬菌体;3)小鼠大肠杆菌感染前和感染后分别使用噬菌体φPTK进行预防和治疗的试验结果表明,未使用噬菌体φPTK的阳性对照组小鼠全部死亡,预防组和治疗组小鼠存活率分别达到80%和60%。

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