所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明公开了一株高产柠檬酸的微生物菌株及其发酵淀粉糖质生产柠檬酸的方法，其分类黑曲霉菌株Aspergillusniger101‑HAC11，保藏号CGMCCNo.12480。同时也公开了以淀粉糖质为碳源发酵生产柠檬酸的培养基配方及发酵过程控制工艺。采用该菌株生产柠檬酸的产量可达166.8g/L。与现有技术相比，该重组黑曲霉菌株柠檬酸产量为220.34g/L，产量提高了32.10%。该方法具有快速，生产工艺流程简单、产品无毒性残留，安全性高的特点。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。

所属分类：医疗健康

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成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。

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成果简介：本发明提供了一种新型L‑脯氨酸‑4‑羟化酶，其氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，来源于Micromonosporasp.CNB394。本发明还提供一种高效表达上述L‑脯氨酸‑4‑羟化酶，从头合成高产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的基因工程菌P，该基因工程菌具有遗传稳定性好和发酵产酸能力较强的优势，不含质粒，利用基因组表达上述新型L‑脯氨酸‑4‑羟化酶，以葡萄糖等廉价碳源为底物从头高效合成反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸，发酵42h反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸产量高达51g/L，具有很好的工业应用前景。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种生产2’‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其应用，属于微生物代谢工程领域。本发明提供的2’‑岩藻糖基乳糖从头合成途径关键酶表达水平的调控策略，通过将不同的酶分别进行基因组过表达或者质粒过表达的调控，能够大幅提高代谢通路的效率，利用相关策略构建的基因工程菌株，与现有技术相比提高13倍以上，为2’‑岩藻糖基乳糖的工业生产奠定了基础。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种耐碱性能提升的脂肪酶突变体及其制备与应用。通过分子生物学技术手段获得野生型的脂肪酶基因，利用易错PCR技术对大肠杆菌密码子优化后的野生型脂肪酶基因进行随机突变，得到脂肪酶突变体N157F，及其编码基因mpcl，重新构建重组载体，并实现了其在枯草芽孢杆菌WB600和毕赤酵母GS115中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得碱耐受性进一步提高的脂肪酶。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明属于生物技术领域，具体涉及一株产甲壳素脱乙酰基酶的马红球菌诱变菌株F6‑C7及其应用。所述甲壳素脱乙酰基酶高产菌株具体为马红球菌(Rhodococcusequi)F6‑C7，保藏编号为CGMCCNo.15723。该菌株是在原始菌株马红球菌F6的基础上，通过ARTP和紫外复合诱变获得，发酵18‑24h后，发酵液中的甲壳素脱乙酰基酶含量达到3400‑3850U/mL，该菌株产甲壳素脱乙酰基酶的速度极快，是目前报道可生产甲壳素脱乙酰基单位酶活力最高的菌株，易于大规模培养。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明公开了一种用于L‑肌氨酸生产的基因工程菌及构建方法与应用，基因工程菌是以大肠杆菌为宿主，通过在其基因组上整合单拷贝亚胺还原酶基因dpkA；单拷贝柠檬酸合酶基因gltA；敲除乙醛酸循环抑制基因iclR；敲除苹果酸合酶基因aceB；单拷贝异柠檬酸裂解酶基因aceA；单拷贝膜结合转氢酶基因pntAB；敲除2‑酮酸还原酶基因ycdW；单拷贝磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因ppc；敲除丙酮酸激酶基因pykF获得。通过系统代谢改造后，工程菌能够以葡萄糖和甲胺为主要原料合成L‑肌氨酸。在5L发酵罐发酵30h后L‑肌氨酸的产量可达10g/L。

所属分类：医疗健康

所属单位：天津科技大学

成果简介：本发明涉及一种高产L‑亮氨酸的相关基因及工程菌构建方法与应用，⑴将leuA突变基因整合至cgl1135假基因位点，leuA突变基因见序列1；⑵将ilvBN突变基因整合至cgl1890假基因位点，ilvBN突变基因件序列2；⑶PCP_2928特异性启动子替换柠檬酸合酶原始启动子，PCP_2928特异性启动子序列见序列3。采用本发明所提供的技术方案在摇瓶发酵30h可生产L‑亮氨酸32g/L，在5L发酵罐发酵50h左右可生产亮氨酸60g/L，最大生产强度可达1.5g/(L×h)，糖酸转化率为30％，是目前报道的发酵法生产L‑亮氨酸的最高水平。