本发明主要涉及一种根据片段长度鉴定白花草木樨(M.albus)和黄花草木樨(M.officinalis)的特异分子标记及其专用引物。具体包括白花草木樨和黄花草木樨基因组DNA的分子标记引物试剂盒及其检测方法。一种鉴定白花草木樨和黄花草木樨的特异分子标记,其主要特点包括有:白花草木樨和黄花草木樨的PCR检测体系相同,其中包括2×Eco Taq PCR SuperMix,引物Melilotus-F(5′-3′):GGTTCAAGTCCCTCTATC,引物Melilotus-R(5′-3′):CTTTACCGTTTGAGCTATCC,ddH2O。鉴定结果表明,该技术具有成本低、准确度高、稳定性好和简单快捷等特点,尤其是受测群体较大时,此种方法具有更显著的经济效应。