本发明涉及药物制剂领域,具体涉及一种汉防己甲素纳米混悬液,所述的汉防己甲素纳米混悬液由汉防己甲素和稳定剂经分散介质纳米化所得,所述的汉防己甲素纳米混悬液粒径为50~600nm,Zeta电位的绝对值为10~40mV,药物与稳定剂的质量比为1:0.1~1,本发明并具体公开了汉防己甲素纳米混悬液的制备方法及在制备抗肿瘤药物中的应用。汉防己甲素纳米混悬液粒径为50‑600nm,稳定性良好,可显著提高汉防己甲素的溶解度和溶出速率,相比于原料药汉防己甲素,汉防己甲素纳米混悬剂在体外对肿瘤细胞抑制率显著,细胞凋亡率和细胞摄取率显著提高,显著提高汉防己甲素溶出速率和抗肿瘤活性,具有广阔的临床应用前景。