本发明提供一种辅酶再生体系，具体为串联葡萄糖‑6‑磷酸‑脱氢酶（G6PDH）及5αY187F‑还原酶重组体和串联NAD激酶及5αY187F‑还原酶重组体，构建其基因工程菌并应用在高效催化5α‑AD生产中的应用；将5αY187F‑还原酶分别与分枝杆菌来源的G6PDH和NAD激酶重组质粒电转至分枝杆菌中进行异源表达，再对其生产效率进行测定，发现串联表达的基因工程菌MNRM3/261‑5αY187F‑G6PDH2对5α‑AD的生产由原来的67.8％提高到了89.5％，串联表达菌株MNRM3/261‑5αY187F‑NAD2对5α‑AD的生产由原来的67.8％提高到了92.6％，有效解决了5α‑还原酶催化活性低的限制问题，为5α‑还原酶的分子改造提供了一条新的思路。
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