本项目针对目前我国养鸡业中存在的饲料禁抗和鸡球虫病难以防治的难题,利用基因工程技术,构建了非抗生素性标记的“食品级”乳酸菌表达载体,建立了细胞侵入技术和树突状细胞诱导肽免疫增强技术,构建了细胞侵入型靶向树突状细胞的基因工程重组乳酸菌。动物实验表明该重组乳酸菌制剂可以有效降低球虫感染鸡肠道病理损伤,显著降低盲肠病变计分,降低球虫卵囊排出量,显示出明显的抗球虫感染效果,抗球虫指数(ACI)达到160以上。具体成果如下:
(1)构建以alr基因为无抗筛选标记锚定表达载体组件6套 ;(2)对鸡球虫保护性抗原锚定表达,筛选有良好免疫源性的基因工程活载体菌株4株;(3)对生物活性因子锚定表达,筛选出高效具免疫增强活性菌株3株;(4)将保护性抗原与免疫佐剂共表达构建具有免疫增强功能菌株3株;(5)将构建成功的菌株联合应用于防治鸡球虫,确定最佳免疫程序,增强动物免疫力,肉鸡毛重体重增加率1.2%,同时平均饲养指数乳酸菌组比药物组提高2.96%,肉用雏鸡存活率提高0.55%,抗球虫指数160≤ACI<180,效果良好。获授权发明专利2件;优化发酵生产工艺1套;在国内外期刊发表学术论文11篇;注册申报微生态制剂新型生物兽药证书,目前进展到环境释放阶段。