高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用

所属分类：现代化工产业

所属单位：天津科技大学

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成果简介

本发明提供一种高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用，该菌是在大肠杆菌的基因组上整合了核苷酸序列如SEQIDNO:1所示的嘧啶核苷操纵子pyrBCAKDFE，并由强启动子Ptrc启动，重构了尿苷合成途径；在基因组上对其自身的PRPP合成酶编码基因prsA进行双拷贝，由强启动子Ptrc启动；同时缺失尿苷激酶(udk)、尿苷磷酸化酶(udp)和核苷水解酶(rihA、rihB和rihC)活性；缺失高丝氨酸脱氢酶1(thrA)活性；缺失鸟氨酸氨甲酰转移酶(argF)活性。该基因工程菌应用于发酵生产尿苷，在5L发酵罐发酵40‑70h可生产尿苷40‑67g/L，最大生产强度可达1.5g/(L×h)，糖苷转化率为15‑25％，是目前报道的发酵法生产尿苷的最高水平。

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